氯霉素胶体金快速检测卡性能参数
氯霉素是一种高效广谱的抗生素,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有较好的抑制作用。人体过量摄入氯霉素可能引起人肝脏和骨髓造血机能的损害,导致再生障碍性贫血和血小板减少、肝损伤等健康危害。《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单(第五批)》(整顿办函〔2011〕1号)中规定,氯霉素在肉制品中不得检出。肉制品中检出氯霉素的原因,可能是生产企业采购了含有氯霉素的原料肉;也可能是生产过程中卫生控制和出厂检验不严格。
深圳艾瑞斯生产的氯霉素胶体金快速检测卡应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测组织样本中氯霉素(Chloramphenicol,CAP)。样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的氯霉素与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上氯霉素偶联物结合。当样本溶液中的氯霉素含量大于检测限时检测线不显色,结果为阳性;当样本溶液中氯霉素含量小于检测限时检测线显紫红色(T线与C线一致或更深),结果为阴性。
样本前处理:
1、取切碎的一定量的去脂肪畜产品组织样品,用均质机均质;
2、称取约2 g 均质物于15 mL 离心管中;
3、依次加入2 mL纯净水和2 mL乙酸乙酯,剧烈振荡混匀;
4、室温下(20-25℃) 4000 转/分钟 离心5 分钟;
5、用移液器移取 1 mL 上清液于10 mL离心管中,65℃下氮(空)气吹干,得固体残渣;
6、先加入1 mL正己烷,振荡混合均匀;再加入0.3 mL样本复溶液,混合均匀后静置,液体明显分层,取下层液体备用。
样品检测:
1、从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面;
2、吸取下层液体120μL于金标微孔中,吹打混匀(至少吹打10次),直至金标微孔内红色物质完全溶解,等待2分钟,吸取全部液体滴加到检测卡的加样孔中;
3、 加样后开始计时,室温下放置8-10分钟判断结果,超过10分钟的结果只能作为参考。
结果判断:
阴性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)显色。
阳性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)不显色。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
注意事项:
1、过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
2、 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
3 、不要触摸检测卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染,否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象,从而影响实验结果的判定。