呋喃西林代谢物快速检测卡(鱼虾、水产品)
呋喃西林属于硝基呋喃类抗菌药物,可用于预防和治疗细菌感染引起的肠道感染疾病,因其价格低、效果好、不易产生抗药性,曾经被广泛应用于禽类、畜类和水产类动物的养殖中。呋喃西林药物代谢快速,在生物体内消除时间短,然后其代谢物(氨基脲)会在生物体内与细胞膜蛋白结合形成稳定的结合态,且会长期存在。
呋喃西林、呋喃唑酮及其代谢物等具有致突变作用,虽然有关呋喃咜酮、呋喃妥因及其代谢物等的毒性数据尚不充分,但出于安全性考虑,欧盟于1995年禁止食用动物中使用硝基呋喃类抗生素。2002年我国农业部公告的“兽药及其它化合物清单”中明确硝基呋喃类药物禁止在所有食品动物中使用;2019年农业农村部修定的“食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单”(农业农村部公告 第250号)中依旧将硝基呋喃类药物作为禁用药品。
深圳艾瑞斯生产的呋喃西林代谢物快速检测卡应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测组织样本中呋喃西林代谢物残留。整个检测过程需要2个小时,适用于各类企业及检测机构。
样本前处理
1、取切碎的一定量的去脂肪水产品组织样品,用均质机均质;
2、称取约5 g 均质物于50 mL 离心管中;
3、依次加入5 mL纯净水,0.5 ml 2.5M提取剂1,0.2 mL样本衍生化试剂,充分振荡混匀3 min;
4、置于60℃水域条件下孵育1小时;
5、取出后加入5 mL 0.1M磷酸氢二钾,0.4 mL 2.5M氢氧化钠,6 mL乙酸乙酯,充分混合3 min,室温下(20-25℃) 4000 转/分钟 离心5 分钟;
6、用移液器移取 3 mL 上层溶液于5 mL离心管中,65℃下氮(空)气吹干,得固体残渣;
7向吹干的离心管中先加入0.5 mL正己烷,加盖振荡混合1 min;再加入0.3 mL专用复溶液,充分混匀,4000 r/min离心1 min;
8取下层液体备用。
样品检测
1、从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面;
2、吸取下层液体120μL于金标微孔中,吹打混匀(至少吹打10次),直至金标微孔内红色物质完全溶解,等待5钟,吸取全部液体滴加到检测卡的加样孔中;
3、 加样后开始计时,室温下放置8-10分钟判断结果,超过10分钟的结果只能作为参考。 7
结果判断
阴性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)显色比C线深或一样深,表示样品中呋喃西林代谢物浓度低于检测限或不含呋喃西林代谢物。
阳性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)不显色或显色比C线明显浅,表示样品中呋喃西林代谢物浓度高于检测限。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
注意事项
1、 过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
2 、检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
3 、不要触摸检测卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染,否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象,从而影响实验结果的判定。