胶体金快速检测卡操作过程中的常见问题

作者: vch12690211
发布于: 2023-08-22 10:59
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胶体金检测卡又被称为胶体金检测试纸,是一种不需要专业技能和昂贵复杂的仪器设备即可实现对抗原、抗体和半抗原等各种分析物的定量和半定量检测的快速检测产品。

胶体金卡的组成:

胶体金检测卡由样品垫、结合垫、层析膜,吸水纸和塑料卡壳五个单元组成。样品垫为经过处理的纤维膜或者玻璃棉,作用是快速吸收待检样品溶液,使其通过虹吸作用向结合垫侧向流动。结合垫同样是纤维膜或者玻璃棉,主要用于吸附有标记的生物活性材料(如金标抗体),它可与待测样品溶液中的检测靶标结合形成肉样可见的免疫复合物。层析膜为纤维膜或者尼龙膜,连接在结合垫和吸水垫之间,其上固定有两条或者多条不同活性材料,形成“检测线T线“和”控制线C线“印迹,主要用于与拦截带标记的免疫复合物,显示检测结果。塑料卡壳是适用于将这些组件包装起来的外壳,方便检测同时具有固定卡条。

胶体金检测卡的反应原理:

检测卡是基于膜免疫层析原理建立起来的快速检测产品。当将制备好的待测样品溶液滴加到检测卡滴液孔(s孔),样品溶液在虹吸作用下由测试端向手柄端侧向流动,待测靶标在侧向流动过程中会与结合垫上的生物活性物质(抗体、抗原或者生物大分子)先发生特异性结合反应,形成复合物,在侧向流动中在与检测线和质控线上的生物活性物质发生结合反应固定起来,形成肉眼可见的检测线和质控线,进而根据检测线和质控线的显色情况判断结果。 

下面我们介绍下胶体金快速检测卡操作过程中的常见问题

常见问题/异常情况

原因分析

建议处理方案

样品层析速度异常慢无样本跑动(在检测窗内不见有液体在膜上流动)

  1. 加样量太少(一般要求加样为40-80ul)。
  2. 样本过于粘稠或有沉淀物(如血块)。
  3. 该测试条已受潮失效。
  1. 增加加液量或滴加少量辅助液
  2. 滴加少理辅助液,对样本进行预处理以去除沉淀物(血清/血浆离心后使用,全血重新取样)
  3. 更换新测试条重新检测,测试条尽量现拆现用

检测窗内出现红/紫色坚线

该试纸条受轻微的物理损伤

该情况不影响检测结果,可在背景清晰后于规定时间内读取结果,或更换新测试条重新检测

有大量全血溢出,NC膜表面偏红,影响结果判读

  1. 该测试条NC膜严重受损(机械损伤)或断裂
  2. 使用已溶血的全血标本
  1. 更换新测试条重新检测。
  2. 尽量使用新鲜全血进行检测

层析时无红/紫红色背景出现

该测试条已受潮失效

更换新测试条重新检测

漏检率偏高(假阴性)

  1. 检测时间太短
  2. 加样量太少,辅助液滴加过量,样本被稀释
  3. 样本中被检物浓度太低
  4. 个别样本中含有较为特殊物质或亚型
  5. 该测试条受潮,活性下降或失活
  1. 按说明书要求正确判读(建议对于较弱阳性或阴性标本至少10-15分钟判读结果
  2. 按说明书要求正确加样或辅助液
  3. 采用其它检测方法进行确认
  4. 更换新测试条重新检测,测试条尽量现拆现用

检测线/对照线不完整

该试剂条有轻微的物理损伤

该情况不影响检测结果,也可更换新测试条重新检测

检测线与对照线之间出现灰暗的阴影

测试条NC膜表面的透明胶带边沿引起的视觉差异

该情况不影响检测结果,可在规定时间内读取结果

检测后出现假阳性结果

  1. 该测试条灵敏度偏高
  2. 该样本含特殊干扰物或已被污染
  3. 在规定的时间后判读结果
  1. 提前判读结果或更换新测试 条重新检测
  2. 用其他检测方法确诊检测结果,确保样本不受污染
  3. 按说明书要求正确判读结果,30分名钟后检测结果可能不准确

呈色检测线比对照线明显深黑

强阳性结果

正常情况,不影响检测结果

检测线或对照相馆线附近出现白斑或白色条带

个别情况,NC膜自身质量原因,生产无法控制

该情况一般不影响检测结果

同一样本血清检出时间快于全血标本

相同体积的血清标本含受检物的量要高于全血标本

正常情况,不影响检测结果

NC膜表面颜色较深(紫红甚至偏紫)

测试刚开始该现象明显,3-5分钟后颜色就会明显褪去属正常现象

正常情况,不影响检测结果

 

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