土霉素/金霉素/四环素残留量如何检测
四环素是一种有机化合物,分子式为C22H24N2O8,本身及其盐类都是黄色或淡黄色的晶体,在干燥状态下极为稳定,除金霉素外,其他的四环素族的水溶液都相当稳定。四环素族能溶于稀酸、稀碱等,略溶于水和低级醇,但不溶于醚及石油醚。四环素族抗生素主要包括有金霉素、土霉素、四环素。四环素族抗生素有共同的化学结构母体。金霉素和土霉素都是四环素的衍生物,前者是氯四环素(chloretracyelin),后者是氧四环素(oxyeracyein),四环素族均为酸碱两性化合物。
四环素的最高残留限量是所有食品动物,肌肉100微克/千克,肝脏300微克/千克,肾脏600微克/千克;牛奶、羊奶100微克/升,禽蛋200微克/千克;鱼肉、虾肉100微克/千克。
深圳艾瑞斯生产的土霉素/金霉素/四环素胶体金快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样品中的四环素在流动的过程中与胶体金标记的特异性四环素单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上的四环素-BSA偶联物的结合,从而导致检测线颜色的深浅变化。当样品中不含有四环素或浓度低于检测限时,T线显色强于C线显色或与C线显色一致。当样品中的四环素浓度等于或高于检测限时,T线显色明显弱于C线显色或T线不显色。而无论样品中是否含有四环素质控线C线都会显色,以示检测有效。
【样品处理】
鸡鱼: 称取3g±0.05g组织,加入稀释后的3ml样本提取液A,振荡3min,再加入300ul样本提取液B,振荡3min,4000rpm离心10min,取上清待检。
虾: 称取3g±0.05g组织,加入稀释后的3ml样本提取液A,振荡3min,再加入240ul样本提取液B,振荡3min,4000rpm离心10min,取上清待检。
【检测步骤】
1.使用前请先仔细阅读说明书。使用前将本试纸条和待检样品恢复至室温。
2.取出试剂筒,打开后取出所需数目的微孔和试纸条,并做好标记。请在1h内尽快使用。检测试剂取出后,请立即盖好试剂筒盖子,防止受潮。
3.用微量移液器吸取200µl待检样品于微孔中,缓慢多次抽吸直至混合均匀,肉眼观察无固形物(该步骤很重要)。
4.室温(20-25℃)孵育5min后,将标记好的试纸条插入微孔中。
5.使试纸条浸在微孔中5min,根据示意图判读结果,其他时间判读无效。
【结果判定】
1、阴性:T线显色强于C线或与C线显色无明显差异,表示样品中不含四环素或其浓度低于检测限。
2、阳性:T线显色明显弱于C线显色,或者T线不显色,表示样品中四环素浓度等于或高于检测限。
3、无效:C线与T线均无红色条带出现或者C线无红色条带出现但T线有红色条带出现;说明此试剂卡已失效、过期,或操作不当,需另做一次测试。